NucleoCounter® NC-200

Innovatív Via1-Cassette™ - kiküszöböli az emberi hibát

A kézi számlálás során a sejtek meghatározásának szubjektív értékelése torzítja az eredményeket. A NucleoCounter® NC-200™ célja, hogy minimálisra csökkentse az emberi beavatkozást a számlálás során. A Via1-Cassette™ használatával elkerülhető minden pipettázás és festés közben keletkező hiba. A Via1-Cassette™ beépített pipettát tartalmaz, és az immobilizált akridin narancs és DAPI fluoreszcens festékek automatikusan megfestik az összes és az elhalt sejtek populációit. A Via1-Cassette™ térfogatra kalibrált, ami biztosítja a sejtszám és az életképesség meghatározásának nagy pontosságát. Összességében ez a szabadalmaztatott, egylépéses életképességi és sejtszámlálási folyamat kevesebb mint 50 másodpercet vesz igénybe.

Egyszerűség és innováció kombinálása a sejtszámlálásban

Az NC-200™ automatizált sejtszámláló használata egyszerű, háromlépéses folyamat: Töltse be a kazettát sejt-szuszpenzióval, helyezze be a kazettát a NucleoCounter® NC-200™ készülékbe, és nyomja meg a „RUN” gombot (1. ábra). Az eredmények automatikusan tárolódnak a mellékelt NucleoView™ szoftverben, és bármikor hozzáférhetők.

A sejtszám vizuális ellenőrzése

Még egyszerű sejtszámlálási és életképességi vizsgálatok esetén is fontos, hogy a megfelelő sejtpopuláció legyen kiválasztva a számláláshoz. Az NC-200™ képcitometriájának legnagyobb előnye, hogy kapcsolatot teremt a kapott képek és a fluoreszcencia ábrák között. Az intuitív NucleoView™ szoftverrel könnyű pontosan meghatározni a számlálási kapukat, így csak a megfelelő események kerülnek beszámításra mind az összes, mind az elhalt sejtek populációiban.

A mellékelt NucleoView™ szoftver lehetővé teszi a kapott kép, a fluoreszcenciát mutató ábrák és a számlálási kapuk beállításainak könnyű összekapcsolását.

Precíz sejtszámláló erősen aggregált sejtekhez

Az aggregált sejtek vizsgálatával a NucleoCounter® NC-200™ fluoreszcens festéssel számolja a DNS-t tartalmazó sejteket. A gondosan kifejlesztett lízis puffer rendszer alapján a ChemoMetec A/S egy optimalizált, kétlépéses protokollt kínál az erősen aggregált sejtek számlálására és életképességük meghatározására. Az első lépésben minden sejt lízisre kerül, és a DNS fluoreszcens festése alapján megszámolják őket. A második lépésben csak az elhalt sejtek kerülnek számlálásra. Mindössze 2 perc alatt a NucleoCounter® NC-200™ pontos életképességet és sejtszámot jelent.

Optimalizált sejtszámlálási protokollok mikrohordozón növekvő sejtekhez

A NucleoCounter® NC-200™ egyedülálló protokollt kínál a mikrohordozón növekvő sejtek számlálására és életképességük meghatározására anélkül, hogy szükség lenne a leválasztásukra. Az A100 és B reagensek alkalmazásával a sejtek lízisre kerülnek, és a sejtmagokat szuszpenzióba hozzák, hogy megszámolhatók legyenek az NC-200™ segítségével (4. ábra). Az elhalt sejtek számlálása azon az elven alapul, hogy az összes elhalt sejt szuszpendált állapotban van, és már nem kapcsolódik a mikrohordozóhoz.

Precíz sejtszámláló zsírszövetből származó őssejtekhez

A zsírszövetből származó őssejtek (ASC-k) és a mesenchymalis őssejtek (MSC-k) a stromavascularis frakcióból (SVF) nagy érdeklődésre tartanak számot, mivel ezek a multipotens őssejtek könnyen hozzáférhetők, és közvetlenül a zsírszövetből elegendő mennyiségben tisztíthatók. Az ASC-k számlálása és életképességének meghatározása közvetlenül az SVF-ből különösen nehéz, mivel a micellák és mikrovezikulumok könnyen összetéveszthetők a sejtekkel, ha kézzel vagy sok automatikus sejtszámlálóval számolunk.
A NucleoCounter® NC-200™ csak a magot tartalmazó sejteket számlálja, teljes mértékben megoldva ezt a kihívást (5. ábra). Lízis puffer hozzáadásával a sejtek és más membránnal zárt részecskék lízisre kerülnek, és csak a szabad magok maradnak szuszpenzált állapotban, amelyeket DAPI-val megfestenek, majd megszámolnak a NucleoCounter® NC-200™ segítségével.

PBMC-k (perifériás vér mononukleáris sejtek) számlálása teljes vérmintákban

A perifériás vér mononukleáris sejtek (PBMC-k) kerek maggal rendelkező sejtek. A PBMC-k az immunrendszer kulcsfontosságú összetevői, ezért a biológiai kutatás sok területén nagy érdeklődésre tartanak számot. A PBMC-k sejtpróbában történő elválasztásának és értékelésének standard módszerei közé tartozik a Ficoll szeparáció, amelyet a PBMC-k számlálása és életképességének meghatározása követ. Ezzel szemben a PBMC-k sejtszáma és életképessége közvetlenül a vérmintából meghatározható, anélkül, hogy a tisztítás időigényes folyamatára lenne szükség.
A NucleoCounter® NC-200™, NC-250™ és NC-3000™ készülékekkel könnyen meghatározható a leukociták teljes életképessége és sejtszáma olyan sejtmintákban, amelyek tartalmaznak vérlemezkéket és vörösvértesteket is (6. ábra).
A vér lízis puffer oldat 17 hozzáadásával a vörösvértestek lízisre kerülnek, a hemoglobin hígul, és csak a magot tartalmazó sejtek maradnak, amelyeket akridin narancssárgával (zöld) és DAPI-val (kék) festenek meg. A vérlemezkéket nem számolják, mivel ezek csak nagyon gyengén festődnek meg. A NucleoCounter® család NC-200™, NC-250™ vagy NC-3000™ készülékeivel végzett képcitometriás elemzés gyors, pontos és egyszerű életképesség- és sejtszám-meghatározást tesz lehetővé leukociták esetében közvetlenül a perifériás vérmintákban.

GMP validáció és 21 CFR 11. részre való felkészültség

A NucleoCounter® NC-200™ úgy lett tervezve, hogy könnyen bevezethető legyen GMP és 21 CFR 11. résznek megfelelő laboratóriumokban. A beépített IQ/OQ/PQ protokollok biztosítják a folyamatos működés ellenőrzését. A szabványosított pdf-jelentések, a felhasználói vezérlés és az audit nyomvonalak lehetővé teszik az események dokumentálását. A mérések nagy reprodukálhatóságával és következetességével együtt a NucleoCounter® NC-200™ az ideális választás automatizált sejtszámláláshoz GMP és 21 CFR 11. résznek megfelelő laboratóriumokban.